如何形成厭氧培養(yǎng)箱操作室的環(huán)境
厭氧培養(yǎng)箱是一種可在無氧環(huán)境下進(jìn)行**培養(yǎng)及操作的專用裝置，可培養(yǎng)*難生長的厭氧生物在大氣中操作時接觸氧而死亡的危險性。
1. 厭氧培養(yǎng)箱應(yīng)安放在溫差較小、操作方便的位置，應(yīng)避免陽光直曬和遠(yuǎn)離采暖設(shè)備，放置平穩(wěn);
2. 將混合氣瓶、氮?dú)馄堪卜牌椒€(wěn)，并分別裝好減壓閥(含壓力表)，安置在適當(dāng)位置;
3. 接上氣路并檢查氣路，為防止漏氣，必要時可在各接管處用密封膠粘合;
一、皓莊厭氧培養(yǎng)箱操作室厭氧環(huán)境形成：
1. 按使用要求放置好必要的附件和器具，并向操作室內(nèi)放入二個無毒塑料袋;
2. 通電源開照明燈，開溫控儀，調(diào)節(jié)所需溫度及**溫度;
3. 操作室內(nèi)放入1000g鈀粒(封閉)和500g干燥劑，并放入美蘭指示劑(封閉);
4. 關(guān)緊取樣室內(nèi)外門，并抽真空校驗;
5. 操作室內(nèi)**次置換(氮?dú)庵脫Q)：
A. 先用橡皮管插入操作室內(nèi)進(jìn)氣口，另一頭插入塑料袋;
B. 接通氮?dú)膺M(jìn)氣路，打開氮?dú)饪刂崎y1，使二只塑料袋充足氮?dú)?，關(guān)閉閥門1，然后扎緊袋口;
C. 把乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊;
D. 把塑料袋內(nèi)氮?dú)鉂u漸放于操作室內(nèi)，至全部放出。
6. 操作室**次置換(氮?dú)庵脫Q)重復(fù)一次充氮過程，取樣室先抽真空，并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。
7. 操作室第三次置換(混合氣體置換)：(混合氣體配比為N2 85%、H2 10%、CO2 5%)
A. 調(diào)換氣路打開混合氣閥3進(jìn)氣，充氣時取樣室先抽真空，并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣;
B. 混合氣充滿塑料袋后，關(guān)掉混合氣閥并打開閥5，使混合氣經(jīng)過流量計，調(diào)整流量計，流量為每分鐘10ml左右;
C. 把塑料袋內(nèi)混合氣漸漸排于操作室內(nèi);
D. 通過三次換氣后，操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。
8. 操作室內(nèi)打開粑粒除氧劑，接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧，一小時后開美蘭指示劑(美蘭安瓶)觀察其變**況，不變色為操作室內(nèi)達(dá)到厭氧環(huán)境;
9. 開紫外線**燈，室內(nèi)進(jìn)行**處理，**時間按具體實(shí)驗自定。
2、菌種的置入和培養(yǎng)：
1. 檢查取樣室內(nèi)門并關(guān)緊之;
2. 打開取樣室外門，將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門;
3. 取樣室充氮置換三次過程：打開真空泵，先抽真空度500ml汞柱(66kPa)以上停，然后人工打開氮?dú)忾y2進(jìn)氣，使指針回復(fù)零位，關(guān)掉閥2。**次重復(fù)操作一次。第三次操作時，使真空度500ml汞柱(66kPa)以上停，然后打開閥4進(jìn)混合氣，使指針回復(fù)零位，后掉閥4。取樣室充氮置換三次過程結(jié)束;
4. 如選定真空度較低就需要增加置換的次數(shù);
5. 取樣室內(nèi)外門開啟、關(guān)緊，再抽低真空度100ml汞柱(13kPa)檢驗;
6. 厭氧培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用的條件：
A. 每天在操作室內(nèi)打開美蘭指示劑觀察，如不正常就必須重新?lián)Q氣;
B. 要長期連續(xù)輸入微量的混合氣體，使補(bǔ)進(jìn)的氮?dú)饽芎臀⒘康难踅Y(jié)合通過催化吸收，保證室內(nèi)厭氧狀態(tài)，補(bǔ)入混合氣流量選定為每分鐘10ml左右;
C. 連續(xù)培養(yǎng)運(yùn)行**，更換一次除氧劑和干燥劑。
7. 操作室內(nèi)培養(yǎng)室內(nèi)室溫度可任意選擇和控制。
8. 混合氣瓶、氮?dú)馄枯敵鰤毫φ{(diào)整：調(diào)節(jié)減壓閥，使輸出壓力0.1Mpa左右。
注意事項
1. 儀器盡可能地安裝于空氣清凈、溫度變化較小的地方;
2. 開機(jī)前應(yīng)**熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明，掌握正確使用方法;
3. 培養(yǎng)物放入必須是在操作室內(nèi)達(dá)到**厭氧環(huán)境后放入;
4. 如發(fā)生故障(停氣等原因)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)(超過12小時則根據(jù)需要把培養(yǎng)物取出另作處理);
5. 經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象;
6. 調(diào)換氣瓶時，注意要扎緊氣管，避免流入含氧氣體;
7. 真空泵按要求使用，定期檢查加油。
